Le 5-fluoro-uracile, un analogue de base pyrimidique, interfère avec le métabolisme des acides nucléiques. Le 5-fluoro-uracile inhibe la méthylation au cours de la synthèse de la thymine (Eidinoff et al., 1957; Bosch étal., 1958; Cohen et al., 1958; Harbers et al., 1959). Le 5-fluoro-uracile est incorporé dans l’acide ribonucléique à la place de l’uracile (Bosch et al., 1958; Chaudhuri et al., 1958; Horowitz & Chargaff, 1959). Ce remplacement de base dans l’acide ribonucléique entraîne des modifications de la composition et des propriétés de certaines protéines synthétisées en présence de 5-fluoro-uracile (Naono & Gros, 1960; Hignett, 1964). La synthèse des ribosomes fonctionnels est inhibée par le 5-fluoro-uracile (Kempner & Miller, 1963).

Les effets du 5-fluoro-uracile et de plusieurs autres pyrimidines fluorées ont été étudiés sur l’œuf de l’échinoderme, Echinarachnius parma par Karnofsky et Basch (1960), qui observent un arrêt du développement au stade jeune blastula. Toivonen et ses collaborateurs (1961) ont publié une intéressante observation sur les effets du 5-fluoro-uracile sur l’œuf de l’amphibien, Triturus vulgaris. Dans cet embryon, le 5-fluoro-uracile inhibe la différenciation des structures neurales sans affecter la différenciation des structures mésodermiques. Nous fondant sur cette observation et sur le fait que la détermination embryonnaire chez les amphibiens et chez les échinodermes peut être modifiée par les mêmes agents, nous avons recherché si le 5-fluoro-uracile est capable de changer la détermination embryonnaire de la larve d’oursin et plus précisément de provoquer la végétalisation des larves c’est à dire l’hyperdéveloppement de leurs structures entomésodermiques.

La 6-méthylpurine, un analogue de l’adénine, déprime la croissance de différents organismes (Clarke et al., 1958; Freese, 1959; Dewey et al., 1960). Cet analogue inhibe la formation d’acide guanylique à partir de l’acide adénylique, diminue l’incorporation de l’adénine dans l’acide ribonucléique et inhibe la synthèse des ribosomes (Miller & Kempner, 1963).

Nous décrirons ici les effets du 5-fluoro-uracile et de la 6-méthylpurine sur le développement de l’œuf d’oursin et nous examinerons les effets antagonistes exercés par certaines bases et nucléosides puriques et pyrimidiques.

Toutes les expériences sont faites sur les œufs de l’oursin Paracentrotus lividus. Deux séries de cultures sont faites. Dans la première série, les œufs sont soumis à l’action des substances étudiées, 30 minutes après la fécondation, c’est à dire avant la première division en 2 blastomères. Dans la seconde série, les larves sont traitées à partir du stade blastula, lorsque l’éclosion est faite et que les cellules mésenchymateuses primaires sont formées. Dans chaque série d’expériences les cristallisoirs reçoivent chacun une quantité équivalente d’œufs, de l’ordre de 2000 œufs par ml., provenant tous d’une même femelle. Les cultures sont faites à la température du laboratoire, soit 19° –20°C. Toutes les solutions de substances étudiées sont préparées directement avec de l’eau de mer au moment de l’emploi. Lorsque les effets de dérivés puriques ou pyrimidiques sont étudiés, ces substances sont ajoutées aux cultures en même temps que le 5-fluoro-uracile ou la 6-méthylpurine. Les cultures contenant du 5-fluoro-uracile sont faites à l’obscurité pour éviter une altération de cette substance par la lumière.

Nous examinerons successivement les effets obtenus en traitant les œufs par le 5-fluoro-uracile et par la 6-méthylpurine utilisés seuls ou en combinaison avec différents dérivés pyrimidiques et puriques.

5-fluoro-uracile

Tous les œufs traités à partir de la fécondation par le 5-fluoro-uracile (100 μg. à 5 μg./ml.) cessent de se segmenter aux stades 16 –32 blastomères. Reportés dans l’eau de mer, après plusieurs lavages, les œufs restent bloqués aux stades 16 –32 blastomères; l’arrêt de la segmentation est donc irréversible.

L’uracile, l’uridine, la cytosine et l’adénine à différentes concentrations (20 μg., 10 μg. et 5 μg./ml.) n’empêchent pas le blocage de la segmentation aux stades 16– 32 blastomères chez les œufs traités par le 5-fluoro-uracile (5 μg./ml.).

En présence de thymine ou de thymidine, les œufs traités par le 5-fluoro-uracile se développent au delà des stades 16– 32 blastomères.

Dans les cultures contenant du 5-fluoro-uracile (10 μg./ml.) et de la thymine (20 μg./ml.) tous les œufs forment des larves prismatiques. Avec le 5-fluorouracile (5 μg./ml.) et la thymine (20 μg./ml.) les œufs se développent en pluteus qui ne se distinguent pas des témoins.

La thymidine protège aussi les œufs contre les effets inhibiteurs du 5-fluorouracile; 50 μg. de thymidine par ml. permettent le développement de pluteus comparables aux témoins en présence de 5-fluoro-uracile (5 μg./ml.).

Les larves traitées au stade blastula avancé, cessent de se développer en présence de 5-fluoro-uracile (100 μg. à 5 μg./ml.). Le blastocèle se remplit de cellules grisâtres. Le pigment est formé. Les spicules ne se différencient que chez les larves traitées par le 5-fluoro-uracile à des concentrations inférieures à 50 μg./ml.

Aucune modification de la détermination embryonnaire, dans le sens de l’animalisation ou de la végétalisation, n’est observée dans ces conditions.

Les larves traitées au stade blastula par le 5-fluoro-uracile (5 μg./ml.) en présence de thymine (20 μg./ml.) se développent en pluteus normaux; par contre les blastulas traitées par l’uracile (20 μg./ml.) en présence de 5-fluoro-uracile (5 μg./ml.) restent bloquées au stade blastula.

6-méthylpurine

Les œufs traités, à partir de la fécondation, par la 6-méthylpurine (100 μg. à 5 μg./ml.) poursuivent leur développement jusqu’au stade blastula. Le blastocèle de ces larves se remplit de cellules grisâtres et la lyse se produit d’autant plus rapidement que la concentration en 6-méthylpurine est plus élevée. Les larves arrêtées au stade blastula, et reportées après plusieurs lavages dans l’eau de mer, restent bloquées à ce stade; l’arrêt du développement est donc irréversible. Aucune modification de la détermination embryonnaire n’est observée dans ces conditions.

En présence de thymine, de thymidine, d’uracile, d’uridine ou de cytosine (20 μg./ml.), la 6-méthylpurine (5 μg./ml.) arrête le développement des œufs au stade blastula.

Dans les cultures contenant de la 6-méthylpurine (20 μg./ml.) et de l’adénine (20 μg./ml.) tous les œufs se développent jusqu’au stade prismatique. Les pluteus se développent en présence de 6-méthylpurine (5 μg./ml.) et d’adénine (20 μg./ml.). Ces pluteus sont plus petits que les témoins.

Les œufs traités par la 6-méthylpurine (20 μg./ml.) en présence d’adénosine (100 μg./ml.) atteignent le stade blastula; seules quelques-unes de ces blastulas sont capables d’ébaucher la formation d’un petit archentéron. Le pigment n’est pas formé et les spicules ne sont que très rarement observés. L’adénosine n’exerce donc qu’une action protectrice très faible sur le développement des œufs traités par la 6-méthylpurine. Par contre les larves cultivées en présence de 6-méthylpurine (20 μg./ml.) et d’adénosine (100 μg./ml.) se lysent plus tard que les larves cultivées en présence de 6-méthylpurine seule à raison de 20 μg./ml. L’adénosine augmente donc la viabilité des larves cultivées en présence de 6-méthylpurine.

Les larves traitées au stade blastula par la 6-méthylpurine (100 μg. à 20 μg./ml.) restent bloquées à ce stade. Le développement peut se poursuivre au delà de ce stade lorsque la concentration en 6-méthylpurine est abaissée. C’est ainsi que, les blastulas traitées par la 6-méthylpurine (10 à 5 μg./ml.) forment un archentéron étroit à parois épaisses. Deux petits spicules triradiés et du pigment sont formés dans ces conditions. Le stade prismatique est atteint dans les cultures contenant de la 6-méthylpurine (2 μg./ml.) et des pluteus se forment en présence de 1 μg./ml. de 6-méthylpurine. Ces pluteus sont toutefois d’une taille inférieure à celle des témoins.

En présence d’adénine (20 μg. à 50 μg./ml.) et de 6-méthylpurine, les larves traitées au stade blastula forment des pluteus de structure normale, mais plus petits que les témoins. Avec une concentration plus élevée en adénine (100 μg./ml.) les larves ne dépassent pas le stade prismatique. Le développement s’arrête d’ailleurs au stade prismatique en présence d’adénine seule à la concentration de 100 μg./ml.

L’adénosine protège aussi les larves contre les effets de la 6-méthylpurine mais son action protectrice est inférieure à celle exercée par l’adénine. C’est ainsi que les blastulas cultivées en présence de 6-méthylpurine (20 μg./ml.) en présence d’adénosine à différentes concentrations (20 μg., 50 μg. et 100 μg./ml.) forment des larves prismatiques. Les blastulas traitées par l’adénosine seule (20 μg./ml.) forment de petits pluteus. En présence d’adénosine (50 μg./ml., 100 μg./ml.) les pluteus formés sont dépourvus de bras anaux et oraux.

L’inhibition de la segmentation des œufs de Paracentrotus lividus par le 5-fluoro-uracile et le renversement de cette inhibition par la thymine et la thymidine suggèrent que le 5-fluoro-uracile interfère avec l’élaboration de la thymine nécessaire à la synthèse de l’acide désoxyribonucléique. Cette interprétation est en accord avec les résultats obtenus par différents auteurs et qui indiquent que le 5-fluoro-uracile inhibe la méthylation au cours de la synthèse de la thymine (Eidinoffei al., 1957; Bosch et al., 1958; Cohen et al., 1958; Harbers et al., 1959).

L’œuf d’oursin synthétise de l’acide désoxyribonucléique au cours de son développement. Les dosages d’acide désoxyribonucléique dans l’œuf vierge et pendant la segmentation indiquent que l’œuf d’oursin contient une petite réserve de matériel précurseur d’acide désoxyribonucléique capable d’assurer la segmentation jusqu’aux stades 16– 32 blastomères (Brachet, 1937; Villee et al., 1949; Abrams, 1951; Elson et al., 1954; Hoff-Jorgensen, 1954; Agrell & Persson, 1956; Whiteley & Baltzer, 1958). Les observations de Nemer (1962) suggèrent qu’il existe dans l’œuf vierge de Paracentrotus lividus, une réserve de thymidine capable d’assurer la synthèse d’acide désoxyribonucléique jusqu’au stade 8 blastomères. Après ce stade, l’œuf doit élaborer la thymidine nécessaire à la poursuite de la synthèse d’acide désoxyribonucléique. Le blocage du développement aux stades 16– 32 blastomères par le 5-fluoro-uracile et la poursuite du développement en présence de thymine suggèrent l’existence d’une réserve de thymine. L’arrêt de la segmentation interviendrait lorsque cette réserve étant épuisée, la synthèse de nouvelles molécules de thymine est inhibée par le 5-fluorouracile. Karnofsky & Basch (1960) ont montré chez l’œuf d’une autre espèce d’échinoderme, Echinarachnius parma, que le 5-fluoro-uracile ainsi que d’autres pyrimidines fluorées arrêtent le développement des larves au stade blastula. Ces substances exercent un effet uniforme sur le développement, mais les concentrations efficaces varient selon l’agent considéré. La thymidine et la thymine protègent les œufs contre les effets des pyrimidines fluorées. Karnofsky et Basch suggèrent que les pyrimidines fluorées provoquent une déficience en thymidine interférant ainsi avec la synthèse des acides désoxyribonucléiques. Le blocage plus tardif du développement chez Echinarachnius parma peut être dû, comme le suggère Nemer (1962), à l’existence de réserves plus importantes que chez Paracentrotus lividus de précurseurs capables d’assurer la synthèse de l’acide désoxyribonucléique jusqu’au stade blastula.

L’inhibition du développement des larves traitées au stade blastula par le 5-fluoro-uracile et la suppression de cette inhibition par la thymine et la thymidine suggèrent également qu’au stade blastula l’effet inhibiteur du 5-fluoro-uracile est dû à son action inhibitrice sur les synthèses d’acides désoxyribonucléiques.

Un effet différentiel sur la différenciation des larves de l’Amphibien Triturus vulgaris traitées par le 5-fluoro-uracile a été observé par Toivonen et ses collaborateurs (1961). Les tissus traités par le 5-fluoro-uracile en présence de thymidine ne différencient pas de structures neurales alors que la différenciation des structures mésodermiques n’est pas affectée. Ces auteurs interprètent ce phénomène de la façon suivante : l’addition de thymidine diminue les effets du 5-fluorouracile sur la synthèse d’acide désoxyribonucléique et l’analogue est incorporé dans l’acide ribonucléique. Les protéines synthétisées en présence de cet acide ribonucléique modifié par l’incorporation du 5-fluoro-uracile, seraient elles-mêmes altérées dans leur composition. Cette synthèse de protéines anormales serait à l’origine de l’inhibition de la différenciation des structures neurales chez la larve d’amphibien.

Chez l’oursin, nous n’avons observé aucune modification de la détermination embryonnaire dans les larves traitées par le 5-fluoro-uracile. La différenciation des structures ectodermiques et celle des structures entomésodermiques sont également inhibées par le 5-fluoro-uracile. Chez l’oursin l’incorporation éventuelle du 5-fluoro-uracile dans les acides ribonucléiques, phénomène qui reste à démontrer dans ce cas particulier, n’apparaît donc pas susceptible de modifier la détermination embryonnaire.

L’effet inhibiteur de la 6-méthylpurine sur le développement de l’œuf d’oursin et son renversement par l’adénine suggèrent que la 6-méthylpurine interfère avec l’utilisation de l’adénine pour la synthèse des acides nucléiques. Chez l’œuf d’oursin, au début du développement, on n’observe pas d’augmentation de la teneur en acide ribonucléique (Schmidt et al., 1948; Villee et al., 1949), celui-ci est cependant le siège d’un métabolisme actif. On observe notamment une augmentation de l’acide ribonucléique nucléaire et une diminution équivalente de l’acide ribonucléique cytoplasmique (Tocco et al., 1963). La méthode autoradiographique a montré que, pendant la période de segmentation, les noyaux présentent un métabolisme très actif de l’acide ribonucléique, pouvant correspondre à la synthèse d’acide ribonucléique ‘messager’ (Ficq et al., 1963). L’étude de l’incorporation de différents précurseurs marqués a permis de mettre en évidence la synthèse d’acides ribonucléiques de ‘transfert’ et ‘messager’ (Gross et al., 1964; 1965; Glisin & Glisin, 1964).

L’adénine, ajoutée au milieu de culture, est incorporée dans les acides nucléiques à tous les stades du développement (Scarano & Kalckar, 1953). L’incorporation de l’adénine est particulièrement active dans les noyaux (Markman, 1961). Les acides ribonucléiques synthétisés dans le noyau jouent un rôle essentiel dans la morphogenèse; c’est ainsi que, l’actinomycine, un inhibiteur des synthèses d’acides ribonucléiques gouvernées par les acides désoxyribonucléiques, arrête le développement des larves avant la gastrulation (Brachet et al., 1963; Lallier, 1963; Gross & Cousineau, 1964).

Le fait que la 6-méthylpurine n’inhibe pas la segmentation mais arrête le développement des larves au stade blastula suggère que cet analogue interfère avec les synthèses d’acides ribonucléiques nécessaires à la différenciation des larves. Deux possibilités d’action de la 6-méthylpurine peuvent être envisagées. Dans la première éventualité, la 6-méthylpurine étant incorporée dans les acides ribonucléiques à la place de l’adénine, ce changement de base entraînant à son tour des modifications des propriétés des acides ribonucléiques, celles-ci peuvent être incompatibles avec les fonctions qu’ils exercent au cours de la différenciation embryonnaire. Dans la seconde éventualité, la 6-méthylpurine interviendrait en empêchant la synthèse de l’acide ribonucléique des ribosomes. Les observations récentes de Comb & Brown (1964), sur l’œuf de l’oursin Lytechinus variegatus, ont montré que la teneur en acide ribonucléique d’origine ribosomale augmente juste avant la gastrulation, cependant que la teneur en acide ribonucléique nucléaire diminue. Or la 6-méthylpurine a été montrée capable d’inhiber la synthèse de l’acide ribonucléique des ribosomes (Miller & Kempner, 1963).

Nous remercions les ‘Produits Roche’ (Paris) pour le don du 5-fluorouracile utilisé dans ces expériences.

Le 5-fluoro-uracile, un analogue de base pyrimidique, bloque le développement des œufs de l’oursin Paracentrotus lividus aux stades 16– 32 blastomères. La thymine et la thymidine suppriment l’effet inhibiteur du 5-fluoro-uracile. L’arrêt du développement est interprété comme dû à l’action inhibitrice du 5-fluoro-uracile sur les synthèses d’acide désoxyribonucléique.

Les larves traitées au stade blastula par le 5-fluoro-uracile cessent de se développer. La thymine et la thymidine renversent les effets du 5-fluoro-uracile. L’uracile est sans action sur l’effet inhibiteur du 5-fluoro-uracile. Aucune modification de la détermination embryonnaire n’est observée dans les œufs traités par le 5-fluoro-uracile.

La 6-méthylpurine, un analogue de la purine, arrête le développement des œufs au stade blastula. L’adénine supprime l’effet inhibiteur de la 6-méthylpurine. Le blocage du développement par la 6-méthylpurine serait dû à son action sur les synthèses d’acides ribonucléiques. Les modifications de la structure des acides ribonucléiques à la suite de l’incorporation de la 6-méthylpurine à la place de l’adénine et l’arrêt de la synthèse d’acide ribonucléique des ribosomes peuvent être envisagés comme causes possibles des effets de la 6-méthylpurine sur le développement.

Les œufs traités au stade blastula par la 6-méthylpurine cessentde se développer Cet effet inhibiteur est supprimé en présence d’adénine. Aucune modification de la détermination embryonnaire n’est observée dans les œufs traités par la 6-méthylpurine.

The effects of 5-fluorouracil and of 6-methylpurine on the development of the egg of Paracentrotus lividus

  1. 5-fluorouracil, a pyrimidine analogue, blocked the development of the sea urchin Paracentrotus lividus at the 16– 32 blastomere stage. Thymine and thymidine suppressed the inhibitory effects of 5-fluorouracil. The block to development is interpreted as due to the inhibitory action of 5-fluorouracil on the synthesis of DNA.

  2. Eggs treated at the blastula stage by 5-fluorouracil. stopped developing. Thymine and thymidine reversed the effects of 5-fluorouracil. Uracil is without effect on the inhibitory action of 5-fluorouracil. No modification of embryonic determination is observed in eggs treated by 5-fluorouracil.

  3. 6-methylpurine, a purine analogue, blocked development of eggs at blastula stage. Adenine suppressed the inhibitory effect of 6-methylpurine. The block to development appears to be due to action of 6-methylpurine on RNA synthesis, possibly by altering RNA structure and/or stopping the synthesis of ribosomal RNA.

  4. Eggs treated at the blastula stage by 6-methylpurine stopped developing. Adenine reversed the effects of 6-methylpurine. No modification of embryonic determination is observed in eggs treated by 6-methylpurine.

Abrams
,
R.
(
1951
).
Synthesis of nucleic acid purines in the sea urchin embryo
.
Expl Cell Res
.
2
,
235
42
.
Agrell
,
I.
&
Persson
,
H.
(
1956
).
Changes in the amount of nucleic acids and free nucleotides during early embryonic development of sea urchin
.
Nature, Land
.
178
,
1398
9
.
Bosch
,
L.
,
Harbers
,
E.
&
Heidelberger
,
C.
(
1958
).
Studies on fluorinated pyrimidines V—Effects on nucleic acid metabolism in vitro
.
Cancer Res
.
18
,
335
43
.
Bracket
,
J.
(
1937
).
Remarques sur la formation de l’acide thymonucléique pendant le développement des œufs à synthèse partielle. Arch. Biol., Paris et Liège
,
48
,
529
48
.
Bracket
,
J.
,
Decroly
,
M.
,
Ficq
,
A.
&
Quertier
,
J.
(
1963
).
Ribonucleic acid metabolism in unfertilized and fertilized sea urchin eggs
.
Biochim. biophys. Acta
,
72
,
660
2
.
Chaudhuri
,
N. K.
,
Montag
,
B. J.
&
Heidelberger
,
C.
(
1958
).
Studies on fluorinated pyrimidines. Ill—The metabolism of 5-fluorouracil-2-C14 and 5-fluoroorotic-2-C14 acid in vivo
.
Cancer Res
.
18
,
318
28
.
Clarke
,
D. A.
,
Elion
,
G. B.
,
Hitchings
,
G. H.
&
Stock
,
C. C.
(
1958
).
Structure-activity relationships among purines related to 6-mercaptopurine
.
Cancer Res
.
18
,
445
56
.
Cohen
,
S. S.
,
Flaks
,
J. C.
,
Barner
,
H. D.
,
Lock
,
M. R.
&
Lichtenstein
,
J.
(
1958
).
The mode of action of 5-fluorouracil and its dérivâtes
.
Proc. natn. Acad. Sci. U.S.A
.
44
,
1004
12
.
Comb
,
D. G.
&
Brown
,
R.
(
1964
).
Preliminary studies on the degradation and synthesis of RNA components during sea urchin development
.
Expl Cell Res
.
34
,
360
70
.
Dewey
,
V. C.
,
Heinrich
,
M. R.
,
Markees
,
D. G.
&
Kidder
,
G. W.
(
1960
).
Multiple inhibition by 6-methylpurine
.
Biochem. Pharmac
.
3
,
173
80
.
Eidinoff
,
M. L.
,
Knoll
,
J. E.
&
Klein
,
D.
(
1957
).
Effect of 5-fluorouracil on the incorporation of precursors into nucleic acid pyrimidines
.
Arch. Biochem. Biophys
.
71
,
274
—5.
Elson
,
D.
,
Gustafson
,
T.
&
Chargaff
,
E.
(
1954
).
The nucleic acids of the sea urchin during embryonic development
.
J. biol. Chem
.
209
,
285
93
.
Ficq
,
A.
,
Aiello
,
F.
&
Scarano
,
E.
(
1963
).
Métabolisme des acides nucléiques dans l’œuf d’oursin en développement
.
Expl Cell Res
.
29
,
128
36
.
Freese
,
E.
(
1959
).
The specific mutagenic effect of bases analogues on phage T 4
.
J. molec. Biol
.
1
,
87
105
.
Glisin
,
V. R.
&
Glisin
,
M. V.
(
1964
).
Ribonucleic acid metabolism following fertilization in sea urchin eggs
.
Proc. natn. Acad. Sci. U.S.A
.
52
,
1548
53
.
Gross
,
P. R.
&
Cousineau
,
G. H.
(
1964
).
Macromolecule synthesis and the influence of actinomycin on early development
.
Expl Cell Res
.
33
,
368
95
.
Gross
,
P. R.
,
Kraemer
,
K.
&
Malkin
,
L. I.
(
1965
).
Base composition of RNA synthetized during cleavage of the sea urchin embryo
.
Biochem. biophys. Res. Commun
.
18
,
569
75
.
Gross
,
P. R.
,
Malkin
,
L. I.
&
Moyer
,
W. A.
(
1964
).
Templates for the first proteins of embryonic development
.
Proc. natn. Acad. Sci. U.S.A
.
51
,
407
14
.
Harbers
,
E.
,
Chaudhuri
,
N. K.
&
Heidelberger
,
C.
(
1959
).
Studies on fluorinated pyrimidines. VIII—Further biochemical and metabolic investigations
.
J. biol. Chem
.
234
,
1255
62
.
Hignett
,
R. C.
(
1964
).
The incorporation of 5-fluorouracil by Staphylococcus aureus (strain Duncan)
.
Biochim. biophys. Acta
,
91
,
584
91
.
Hoff-Jorgensen
,
E.
(
1954
).
Deoxynucleic acid in some gametes and embryos
.
Proc. 7th Symp. Colston Res. Soc. Univ. Bristol, 79-88
.
Horowitz
,
J.
&
Chargaff
,
E.
(
1959
).
Massive incorporation of 5-fluorouracil into a bacterial ribonucleic synthesis
.
Nature, Lond
.
184
,
1213
5
.
Karnofsky
,
D. A.
&
Basch
,
R. S.
(
1960
).
Effects of 5-fluorodeoxyuridine and related halogenated pyrimidines on the Sand-dollar embryo
.
J. biophys. biochem. Cytol. 1,61-71
.
Kempner
,
E. S.
&
Miller
,
J. H.
(
1963
).
The mechanism of action of purine and pyrimidine analogs in microorganisms
.
Biochim. biophys. Acta
,
76
,
341
6
.
Lallier
,
R.
(
1963
).
Effets de l’actinomycine D sur le développement normal et sur les modifications expérimentales de la morphogenèse de l’œuf de l’oursin Paracentrotus lividus. Experientia
,
19
,
572
3
.
Markman
,
B.
(
1961
).
Regional differences in isotopic labelling of nucleic acid and protein in early sea urchin development
.
Expl Cell Res
.
23
,
118
29
.
Miller
,
J. H.
&
Kempner
,
E. S.
(
1963
).
Effets of an adenine analog on yeast metabolism
.
Biochim. biophys. Acta
,
76
,
333
40
.
Naono
,
S.
&
Gros
,
F.
(
1960
).
Effets d’un analogue de base nucléique sur la biosynthèse de protéines bactériennes. Changements de la composition globale des proteines
.
C. r. Hebd. Séanc. Acad. Sci., Paris
,
250
,
3527
9
.
Nemer
,
M.
(
1962
).
Characteristics of the utilization of nucleosides by embryos of Paracentrotus lividus. J. biol. Chem
.
237
,
143
9
.
Scarano
,
E.
&
Kalckar
,
H. M.
(
1953
).
Nucleic acid synthesis in developing sea urchin embryos
.
Pubbl. Staz. zool. Napoli
,
2A
,
188
-
96
.
Schmidt
,
G.
,
Hecht
,
L.
&
Thannhauser
,
S. J.
(
1948
).
The behaviour of the nucleic acids during the early development of the sea urchin egg (Arbacia)
.
J. gen. Physiol
.
31
,
203
7
.
Tocco
,
G.
,
Orengo
,
A.
&
Scarano
,
E.
(
1963
).
Ribonucleic acids in the early embryonic development of the sea urchin
.
Expl Cell Res
.
31
,
52
60
.
Toivonen
,
S.
,
Kohonen
,
J.
,
Saukkonen
,
J.
,
Saxén
,
L.
&
Vainio
,
T.
(
1961
).
Preliminary observations of the inhibition of neural induction by 5-fluorouracil
.
Embryologia
,
6
,
177
84
.
Villee
,
C. A.
,
Lowens
,
M.
,
Gordon
,
M.
,
Leonard
,
E.
&
Rich
,
A.
(
1949
).
The incorporation of 32P into the nucleoproteins and phosphoproteins of the developing sea urchin embryo
.
J. Cell. comp. Physiol
.
33
,
92
112
.
Whiteley
,
A. H.
&
Baltzer
,
F.
(
1958
).
Development, respiratory rate and content of desoxyribonucleic acid in the hybrid Paracentrotus ♀ × Arbacia ♂ - Pubbl. Staz. zool. Napoli
,
30
,
402
57
.